NCI-H520人肺鱗癌細胞傳代、復蘇注意要點

NCI-H520人肺鱗癌細胞
Human Lung Squamous Cell Carcinoma ,H520
貨號：YJ-h238（STR鑒定）
價格： 1800.0
規格： 1*10 ⁶              
細胞介紹
NCI-H520細胞是由Gazdar AF等在1982年建系而來，源于鱗狀細胞肺癌組織；NCI-H520細胞p53 mRNA表達水平較正常肺組織低，但是沒有大的結構DNA的異常。NCI-H520細胞角蛋白、波形蛋白陽性，神經絲三聯蛋白陰性；NCI-H520細胞在軟瓊脂中可形成克隆。
細胞特性
1） 來源：人 肺癌組織
2） 形態：貼壁，上皮細胞樣，多角形，緊密排列
3） 含量：>1x10⁶  細胞數
4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5）用途：僅供科研使用。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
下面T25瓶為例；
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
 
從2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗外包及論文潤色服務，協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯系。
實驗代做：

Elisa免費代做	Wb代做	蛋白芯片定制	石蠟冰凍切片
HE染色	透射電鏡	掃描電鏡服務	免疫共沉淀
流式細胞分選	CCK8檢測代做	組織芯片微陣列	免疫細胞化學ICC
熒光染料標記	油紅O染色	免疫熒光染色	免疫共沉淀（Co-IP）實驗
熒光定量PCR	探針合成	酪蛋白酶譜MMP	免疫組化IHC
激光共聚焦	蛋白雙向	蛋白相互作用	課題協助外包
CBA流式多因子	瓊脂糖凝膠電泳	疾病模型	藥理毒理