• 吸取過多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。

 

• 吸取過多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。

 

• 如所實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低，請(qǐng)聯(lián)系研謹(jǐn)生物技術(shù)以尋求幫助。

 

• 當(dāng)血液樣本粘度過高需稀釋時(shí)，最優(yōu)稀釋方法：將血液與樣本稀釋液（產(chǎn)品編號(hào)：2010C1119）1:1 稀釋混勻備用。注：不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞?huì)降低細(xì)胞得率及活性。如血液樣本經(jīng)過稀釋則分離過程中需適當(dāng)降低離心力和離心時(shí)間。

 

• 因血液樣本的個(gè)體差異及血液粘度不同，需調(diào)整離心力及離心時(shí)間，離心力最大不超過

 
1000g。
 
【儲(chǔ)存條件及有效期】
 
常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
 
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
 
【參考值（參考范圍）】
 
本實(shí)驗(yàn)淋巴細(xì)胞提取率及純度均大于 80%。
 
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例，用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
 

紅細(xì)胞

白細(xì)胞

血小板

（4.0-10.0）×109

（4.0-5.5）×1012

（1.0-3.0）×1011

含量（個(gè)/L）

中性粒細(xì)胞

淋巴細(xì)胞

單核細(xì)胞

50%-70%

20%-40%

3%-8%

【灝洋新型離心管最佳實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】

抗凝血液

稀釋液

分離液

離心力

離心時(shí)間

15mL 離心管

3mL

3mL

約 4mL

（與隔片持平）

400-500g

4mL

/

（最大不超過

20-30min

10mL

10mL

約 15mL

50mL 離心管

1000g）

15mL

/

（與隔片持平）

 
【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】
 

• 所獲得淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。

 

• 所獲得淋巴細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。

• 所獲得淋巴細(xì)胞的鑒定方法A.流式細(xì)胞技術(shù)B.免疫組化技術(shù)C.原位雜交技術(shù)

 
D.PCR 技術(shù)
 
 
【可能存在的問題及解決方法】
 
1.  由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：
 

出現(xiàn)情況	出現(xiàn)原因	建議解決方案
離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層	轉(zhuǎn)速過小或離心時(shí)間過短	適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速
離心后目的細(xì)胞存在于分離液中	轉(zhuǎn)速過大或離心時(shí)間過長(zhǎng)
離心后白環(huán)層彌散	細(xì)胞密度過大	調(diào)整細(xì)胞密度
離心后白環(huán)層太淺或看不見	細(xì)胞密度過小

 

• 本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，恒定離心時(shí)間，對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。

 

• 本分離液依照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，全部使用藥用級(jí)原料，性能指標(biāo)與國(guó)產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同，可

 
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不完全的情況，可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
 
注：在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù)，直至達(dá)到最佳分離效果，離心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。